Trong lĩnh vực liệu pháp tế bào, hiệu quả và sự ổn định của nuôi cấy tế bào T ảnh hưởng trực tiếp đến sự thành công hay thất bại của các ứng dụng lâm sàng. Là hai phương tiện nuôi cấy phổ biến, sự khác biệt trong hoạt động của tấm 96 lỗ và tấm 6 lỗ không chỉ được phản ánh ở quy mô mà còn liên quan đến các chi tiết chính của quy định vi môi trường tế bào.

1. Sự đồng nhất của tiêm chủng tế bào

Đặc tính thông lượng cao của tấm 96 lỗ đòi hỏi sự phân phối huyền phù tế bào chính xác hơn. Nên sử dụng pipet đa kênh kết hợp với ly tâm tốc độ thấp (200 × g, 5 phút) để tạo điều kiện giải quyết tế bào, tránh "hiệu ứng cạnh" do sức căng bề mặt của chất lỏng gây ra bởi lỗ viền. Trong khi 6 lỗ tấm đơn có thể tích lớn hơn (2-4mL), cần phải sử dụng "phương pháp lắc chéo" trộn đều bằng tay để đảm bảo phân phối tế bào đồng đều.

2. Chiến lược thay thế môi trường

Khi đổi nửa lượng dịch, 96 lỗ dễ làm xáo trộn tế bào dán tường, có thể nghiêng góc 45 độ chậm rãi hấp thụ; Nếu sử dụng môi trường không có huyết thanh, cần có keo ma trận trước (như Corning) ® Matrigel) Tăng cường sự gắn kết. Tấm 6 lỗ thì có thể thông qua "Phương pháp thay đổi độ dốc" trước tiên thay thế 50% cơ sở nuôi cấy, 24 giờ sau mới thay thế toàn bộ, giảm bớt căng thẳng tế bào.

3. Tối ưu hóa trao đổi khí

Khi nuôi cấy ngăn xếp tấm 96 lỗ, nên sử dụng nắp tấm có màng thoáng khí (ví dụ: Greiner Bio-One CELLSTAR) ®）， Và kiểm soát xếp chồng lên nhau không quá 3 lớp, tránh thiếu oxy ở lỗ trung tâm. Tấm 6 lỗ có thể được đặt trực tiếp trong bể nuôi cấy thủy triều có chứa 5% CO₂, nhưng cần chú ý đến khoảng cách giữa mép của tấm lỗ và quạt hộp để ngăn chặn sự bốc hơi quá mức cục bộ.

4. Mẹo theo dõi kiểu hình

Bảng 96 lỗ được khuyến nghị sử dụng các hệ thống hình ảnh nội hàm cao như ImageXpress Micro để quét đa điểm, tự động loại bỏ dữ liệu nhiễu bong bóng bằng thuật toán AI. Tấm 6 lỗ phù hợp hơn cho việc mở rộng trước khi phân loại dòng chảy. Khi lấy mẫu, nên sử dụng "phương pháp đâm chéo" để đâm liên tục 3 lần dọc theo đường chéo với đầu súng 1mL để đảm bảo tính đại diện của mẫu.

‍

‍