Phán đoán kháng thể có bất hoạt hay không, cốt lõi xem nó có thể liên kết kháng nguyên hiệu quả hay phát huy tác dụng trung hòa hay không. Các phương pháp thường được sử dụng là kiểm tra trung hòa và kiểm tra ELISA, một chức năng đo trực tiếp và một khả năng kết hợp định lượng.

I. Kiểm tra trung hòa: đo hoạt động chức năng

Xét nghiệm trung hòa virus: Sau khi trộn kháng thể và virus để lây nhiễm tế bào, nếu tỷ lệ sống sót của tế bào cao, chứng tỏ kháng thể trung hòa virus, hoạt động bình thường.

Thử nghiệm trung hòa độc tố: Ví dụ như thử nghiệm kháng "O", sau khi trộn kháng thể và độc tố thêm hồng cầu, nếu hồng cầu không hòa tan, chứng tỏ kháng thể trung hòa độc tố, hoạt động không thành vấn đề.

II. Kiểm tra ELISA: Khả năng kết hợp định lượng

Nguyên tắc: Kháng thể được hấp phụ trên chất mang pha rắn, sau khi thêm kháng thể được thử nghiệm, đánh dấu sự xuất hiện của lưỡng kháng bằng enzyme, mức độ xuất hiện màu và lượng kháng thể tương quan.

Các bước:

Bao kháng nguyên: Cố định kháng nguyên trong tấm vi mô.

Thêm kháng thể được thử nghiệm: liên kết với kháng nguyên.

Thêm enzyme nhị kháng: kết hợp với kháng thể.

Phản ứng tạo màu: cộng với chất nền, mức độ tạo màu phản ánh lượng kháng thể.

Phân tích kết quả: đo giá trị hấp thụ, so sánh với đường cong tiêu chuẩn, đánh giá hiệu lực và hoạt động của kháng thể.

III. Các phương pháp phụ trợ khác

Hóa học mô miễn dịch (IHC): Xem xét sự kết hợp giữa kháng thể và kháng nguyên mô để đánh giá tính đặc hiệu.

Kiểm tra phản ứng chéo: Xác minh rằng kháng thể liên kết với kháng nguyên không mục tiêu và tránh dương tính giả.

IV. Lưu ý

Điều kiện thử nghiệm: nhiệt độ, độ pH, vv phải được kiểm soát chặt chẽ để tránh ảnh hưởng đến kết quả.

Bảo quản kháng thể: tránh đông lạnh lặp đi lặp lại, ngăn ngừa mất hoạt động.