ởBộ dụng cụ ELISA tế bào ngườiTrong đó, lựa chọn các điều kiện thí nghiệm là rất quan trọng, bao gồm:

　　

1, Lựa chọn chất mang rắn: Nhiều chất có thể được sử dụng làm chất mang rắn, chẳng hạn như polyvinyl clorua, polystyrene, polyacrylamide, cellulose, v.v. Hình thức có thể là tấm lõm, ống nghiệm, hạt, v.v. Hiện nay thường được sử dụng là tấm lõm polystyrene 40 lỗ. Bất kể chất mang nào, nó có thể được sàng lọc trước khi sử dụng: các gói được phản ứng với cùng một lượng kháng nguyên, phản ứng trong cùng điều kiện thí nghiệm, quan sát xem phản ứng kết xuất màu có đồng nhất hay không, để đánh giá hiệu suất hấp phụ của nó là tốt hay không.

　　

2, gói được lựa chọn bởi kháng thể (hoặc kháng nguyên): Khi kháng thể (hoặc kháng nguyên) hấp phụ trên bề mặt của chất mang rắn, yêu cầu độ tinh khiết tốt, thường yêu cầu pH từ 9,0~9,6. Nhiệt độ, thời gian và lượng protein hấp thụ cũng có ảnh hưởng nhất định. Thông thường 4 độ C sử dụng 18 - 24 giờ. Nồng độ gói protein thích hợp cần được chuẩn độ: tức là nồng độ protein khác nhau (0,1, 1,0 và 10 μg/ml, v.v.), giá trị OD của mẫu dương tính được quan sát đồng thời trong các điều kiện thử nghiệm khác. Chọn nồng độ có giá trị OD zui lớn và lượng protein zui nhỏ. Đối với hầu hết các protein, nó thường là 1-10 μg/ml.

　　

3, Lựa chọn nồng độ làm việc của kháng thể tiêu chuẩn: Trước tiên, hiệu lực ban đầu được xác định bằng phương pháp ELISA bộ dụng cụ ELISA tế bào người trực tiếp (xem phần kháng thể tiêu chuẩn). Sau đó, các điều kiện khác được cố định hoặc nồng độ làm việc được chuẩn độ chính xác trong các hệ thống thí nghiệm chính thức bằng cách sử dụng "phương pháp phalanx" (lớp phủ, mẫu tham chiếu của mẫu được thử nghiệm và độ pha loãng khác nhau của kháng thể nhãn enzyme).

　　

4, Lựa chọn chất nền enzyme và nhà tài trợ hydro: Lựa chọn nhà tài trợ hydro đòi hỏi giá rẻ, an toàn, phản ứng kết xuất màu rõ ràng và không màu. Một số chất cung cấp hydro (như OPD, v.v.) có khả năng gây ung thư và cần được bảo vệ. Nếu điều kiện cho phép, nên sử dụng các chất cung cấp hydro không gây ung thư và nhạy cảm cao như TMB và ABTS, hiện đang tương đối hài lòng. Sau một thời gian hoạt động của chất nền, nên thêm axit mạnh hoặc kiềm mạnh để chấm dứt phản ứng. Thời gian tác dụng chung của chất nền nên là 10-30 phút. Dung dịch cơ chất phải được pha chế tươi, đặc biệt nếu H2O2 được thêm vào trước khi sử dụng.