5637 Tế bào ung thư bàng quang ở người

Sản phẩm của công ty chỉ dành cho nghiên cứu khoa học, không được dùng để chẩn đoán lâm sàng!

Dòng tế bào/chủng:

Dòng tế bào (Cell Line): Vũ điệu nuôi cấy nguyên đại thành công tức là dòng tế bào trưởng thành, do dòng tế bào (Lineage of Cells) trước đây tồn tại trong nuôi cấy nguyên đại tạo thành.

Dòng tế bào (Cell Strain): thu được từ nuôi cấy thế hệ đầu hoặc dòng tế bào bằng phương pháp chọn lọc hoặc nhân bản được gọi là dòng tế bào. Các tính chất hoặc dấu hiệu đặc biệt của các chủng tế bào phải luôn có mặt trong suốt quá trình nuôi cấy. Nếu không thể tiếp tục di truyền hoặc đại số hữu hạn, nó được gọi là dòng tế bào hữu hạn (finitecell strain). Dòng tế bào liên tục (continuous cell strain). Đối với các tế bào khối u của con người, nuôi cấy bên ngoài cơ thể trong hơn nửa năm, phát triển ổn định và liên tục truyền lại có thể được gọi là chủng hoặc dòng liên tục.

a) Đào tạo thế hệ đầu

Nuôi cấy sơ sinh, còn được gọi là nuôi cấy nguyên sinh, là nuôi cấy đầu tiên được thực hiện bởi các tế bào, mô và cơ quan được lấy trực tiếp từ cơ thể. Một khi các tế bào đã được nuôi cấy di truyền (subculture), chúng không còn được gọi là nuôi cấy sơ cấp mà được gọi là dòng tế bào.

(2) Dòng tế bào

Nuôi cấy thế hệ đầu tiên bắt đầu di truyền các tế bào sau khi nuôi cấy đầu tiên, được gọi là dòng tế bào. Dòng tế bào hữu hạn (Finite Cell Line) được gọi là dòng tế bào hữu hạn (Finite Cell Line). Các dòng tế bào có khả năng sinh sản vô hạn được gọi là dòng tế bào liên tục hoặc dòng tế bào vô hạn (Infinite Cell Line). Vô hạn dòng tế bào phần lớn đã phát sinh dị bội hóa, có dị bội nhân hình, có khả năng đã trở thành tế bào ác tính, bởi vậy về bản chất đã là phát sinh chuyển hóa dòng tế bào. Các dòng tế bào vô hạn chỉ có tính bất tử (hoặc tính bất tử), nhưng vẫn giữ được tính ức chế tiếp xúc và tính gây ung thư không có dị thể; Có người không chỉ có tính vĩnh sinh, tiêm chủng dị thể cũng có tính gây u, chứng tỏ đã ác tính hóa. Hai dòng tế bào vô hạn có tính chất khác nhau này thường không nghiêm ngặt lắm trong việc áp dụng những danh từ này trong các tài liệu trong và ngoài nước. Vì khái niệm minh xác, trong quyển sách đối với hệ tế bào vô hạn có ác tính áp dụng! Hệ tế bào chuyển hóa ác tính! Từ ±có nghĩa là có thể thích hợp hơn. Còn đối với những hệ tế bào chỉ có tính vĩnh sinh mà không có ác tính, thì dùng hệ tế bào vô hạn hoặc chuyển hóa hệ tế bào là được. Các dòng NIH3T3, Rat-1, 10T1/2 hiện đang lưu hành đều thuộc loại tế bào này.

Hoạt động nuôi cấy tế bào:

1) Tế bào hồi sức: Các ống lưu trữ đông lạnh chứa 1 mL đình chỉ tế bào nhanh chóng lắc và tan băng trong bồn tắm nước 37 ℃, cộng với 4 mL môi trường trộn đều. Ly tâm 3 phút trong điều kiện 1000 vòng/phút, bỏ chất lỏng, thêm 1-2 mL môi trường và thổi đều. Sau đó, tất cả đình chỉ tế bào sau đó được nuôi cấy qua đêm bằng cách thêm vào một chai nuôi cấy với một lượng vừa phải môi trường (hoặc bằng cách thêm đình chỉ tế bào vào một đĩa 6 cm với khoảng 4 mL môi trường nuôi cấy qua đêm). Thay dịch vào ngày hôm sau và kiểm tra mật độ tế bào.

2) Di truyền tế bào: Nếu mật độ tế bào đạt 80% -90%, nuôi cấy di truyền có thể được thực hiện. a、 Bỏ đi nuôi cấy, dùng PBS không chứa canxi, magiê tẩy tế bào 1 - 2 lần.

b、 Thêm 1 mL dung dịch tiêu hóa (0,25% Trypsin-0,53 mM EDTA) trong chai nuôi cấy, làm cho chất dịch tiêu hóa thấm vào tất cả các tế bào, loại bỏ chất dịch tiêu hóa, đặt chai nuôi cấy trong 37 ℃ hộp tiêu hóa 1-3 phút (tùy thuộc vào sự tiêu hóa của tế bào), sau đó theo dõi sự tiêu hóa của tế bào dưới kính hiển vi, nếu hầu hết các tế bào tròn và rơi ra, nhanh chóng lấy lại bàn điều hành, sau vài lần nhấp chuột vào chai, thêm 2-3ml môi trường để chấm dứt tiêu hóa. Nhẹ nhàng đánh đều rồi cho vào ống ly tâm vô trùng, 1000 vòng/phút ly tâm 5 phút, bỏ đi dịch thanh lọc, bổ sung 1 - 2 ml dịch nuôi cấy rồi thổi đều. 。

c、 Đình chỉ tế bào được chia theo tỷ lệ 1: 2 vào một đĩa hoặc chai mới với một môi trường 8 mL mới và được nuôi cấy trong một môi trường nuôi cấy.

3) Đóng băng tế bào: Khi tế bào phát triển tốt, có thể đóng băng tế bào. Ví dụ như chai T2 dưới đây.

a、 Thu thập các tế bào, nạp chúng vào ống ly tâm vô trùng, ly tâm trong 4 phút ở 1000 vòng/phút, loại bỏ chất lỏng, làm sạch bằng PBS, loại bỏ PBS và đếm tế bào.

b、 Căn cứ vào số lượng tế bào thêm vào dịch đông lạnh tế bào không huyết thanh, làm cho mật độ tế bào 5 × 106~1 × 107/mL, nhẹ nhàng trộn đều, mỗi ống đông lạnh lưu trữ 1 mL huyền dịch tế bào, chú ý đến ống đông lạnh để đánh dấu tốt.

c、 Đặt ống lưu trữ đông lạnh vào tủ lạnh -80 ℃, sau 24 giờ chuyển sang lưu trữ nitơ lỏng. Ghi lại vị trí ống lưu trữ đông lạnh để lấy lần sau.

Sản phẩm công ty đang bán: