Tế bào nội mô vi mạch phổi người

I. Thuộc tính cơ bản của tế bào

Tên tế bào:Tế bào nội mô vi mạch phổi người

Nguồn mô: Phổi

Nguồn gốc loài: People

Thông số kỹ thuật sản phẩm: Chai nuôi cấy tế bào 5 × 105cells/T25

Giới thiệu tế bào:Tế bào nội mô vi mạch phổi ngườiTách từ mô phổi; Phổi là cơ quan hô hấp của cơ thể, nằm trong lồng ngực, mỗi bên trái phải, bao phủ trên tim. Phổi có phân thùy, trái hai phải ba, tổng cộng năm thùy. Phổi (chỉ khí quản, phế quản......) nối liền với cổ họng, mũi, cho nên gọi là cửa ngõ của phổi, mũi là khiếu ngoài phổi. Các tế bào nội mô vi mạch tham gia chặt chẽ vào một loạt các phản ứng sinh lý và viêm bao gồm tái tạo, phát triển, chữa lành vết thương. Các tế bào có hình thoi hoặc đa giác và sắp xếp giống như sỏi hoặc lát đá sau khi hình thành một lớp đơn. Các tế bào nội mô vi mạch phổi tạo thành một rào cản bán chọn lọc có ý nghĩa quan trọng đối với trao đổi khí phổi và điều chỉnh dòng chảy của chất lỏng và các chất hòa tan giữa máu và kẽ phổi.

Điều kiện gói: PLL (0,1 mg/ml), gelatin (0,1%)

Môi trường: với FBS, phụ gia tăng trưởng, Penicillin, Streptomycin, vv

Tần số thay đổi chất lỏng: thay đổi chất lỏng mỗi 2-3 ngày

Đặc tính tăng trưởng: Dán tường

Hình thái tế bào: Nội mô giống tế bào

Đặc tính truyền: Có thể truyền 2-3 thế hệ

Tỷ lệ truyền: 1: 2

Dịch tiêu hóa: 0,25%

Điều kiện nuôi: pha khí: không khí, 95%; CO2，5%

Hai, phương pháp sử dụng:

Tế bào nội mô vi mạch phổi ngườiLà một loại tế bào dán tường, hình thái tế bào giống như tế bào nội mô, theo quy trình hoạt động tiêu chuẩn của bộ phận kỹ thuật, tế bào có thể truyền qua 2-3 thế hệ; Chúng tôi khuyên bạn nên tiến hành các thí nghiệm liên quan càng sớm càng tốt sau khi nhận được tế bào.

Sau khi khách hàng nhận được tế bào, vui lòng làm theo các phương pháp sau.

1. Lấy chai nuôi cấy tế bào T25, khử trùng thân chai bằng rượu 75%, loại bỏ màng niêm phong và đặt 3-4h vào hộp nuôi cấy tế bào 37 ℃, 5% CO2, độ ẩm bão hòa để ổn định trạng thái tế bào.

2. Tiêu hóa tế bào dán tường

1) Hút môi trường từ chai nuôi cấy tế bào T25, rửa tế bào một lần bằng PBS;

2) Thêm 0,25% dung dịch tiêu hóa 1mL đến chai nuôi cấy T25, sau khi xoay nhẹ chai nuôi cấy để bao phủ toàn bộ đáy chai, hút dung dịch tiêu hóa dư thừa, tắm ấm 37 ℃ trong 1-3 phút; Quan sát dưới kính hiển vi đảo ngược, đợi sau khi tế bào co lại thành tròn, lại thêm vào môi trường nuôi cấy 5 ml để chấm dứt tiêu hóa;

3) Nhẹ nhàng thổi và trộn đều bằng ống hút, tiêm truyền bình T25 theo tỷ lệ truyền, sau đó bổ sung môi trường tươi đến 5mL, đặt trong môi trường tế bào 37 ℃, 5% CO2, độ ẩm bão hòa;

4) Sau khi tế bào được dán vào tường, nuôi dưỡng và quan sát; Sau đó thay thế cơ sở bồi dưỡng mới theo tần suất thay dịch.

3. Tế bào nhận hàng rơi ra

1) Thu thập tất cả đình chỉ tế bào, 1000rpm, ly tâm 5 phút, giữ lại lượng mưa;

2) Thêm 0,25% dung dịch tiêu hóa 0,5mL vào ống ly tâm, kết tủa treo nặng, đặt ở 37 ℃ tiêu hóa 3 phút (hoặc 4 ℃ tủ lạnh đứng 5-7 phút); Sau khi tiêu hóa, thêm 5 ml môi trường vào ống ly tâm để chấm dứt tiêu hóa;

3) Sau 1000rpm, ly tâm 5 phút, loại bỏ Shangqing, lắng đọng lại với 5ml môi trường, tiêm vào chai nuôi cấy mới;

4) Sau khi tế bào được dán vào tường, nuôi dưỡng và quan sát; Sau đó thay thế môi trường tươi (37 độ C) theo tần suất thay dịch.

5) Các tế bào dán tường trong chai gốc được xử lý theo tiêu hóa bình thường.

4. Thí nghiệm tế bào

Do đặc thù dán tường tế bào gốc, các tế bào gốc dán tường sau khi tiêu hóa được chuyển sang các dụng cụ thí nghiệm khác (chẳng hạn như bò thủy tinh, đĩa nuôi cấy, đĩa petri co-focus, v.v.), cần phải bọc các dụng cụ thí nghiệm để tăng cường tính dán tường tế bào và tránh các nguyên nhân tế bào không được dán tốt ảnh hưởng đến thí nghiệm; Các gói thường được sử dụng với collagen đuôi chuột I (2-5μg/cm2), poly-lysine PLL (0,1mg/ml), gelatin (0,1%), tùy thuộc vào loại tế bào. Các tế bào lơ lửng/bán lơ lửng không cần bọc chăn.

Sản phẩm công ty đang bán:

Lưu ý nuôi cấy tế bào:

Những lưu ý về nuôi cấy tế bào gốc Nuôi cấy tế bào gốc là một kỹ thuật thí nghiệm rất quan trọng, nắm vững những điều cần lưu ý này, có thể làm cho thí nghiệm của bạn thuận lợi hơn.

Đầu tiên, hoạt động vô trùng là chìa khóa. Hãy chắc chắn để giữ cho môi trường hoạt động sạch sẽ và tránh ô nhiễm vi khuẩn hoặc nấm mốc, nếu không thí nghiệm sẽ thất bại.

Thứ hai, điều quan trọng là phải chọn môi trường và huyết thanh phù hợp. Các tế bào khác nhau có nhu cầu khác nhau về môi trường và huyết thanh, vì vậy hãy chọn môi trường và huyết thanh phù hợp dựa trên loại tế bào.

Ngoài ra, cũng là thành phần trong nuôi dưỡng tế bào. Phải phối chế mới, cũng phải bổ sung định kỳ trong quá trình lưu trữ.

Nuôi cấy tĩnh cũng rất quan trọng trong quá trình nuôi cấy tế bào. Các tế bào cần một khoảng thời gian nhất định để thích nghi với môi trường mới sau khi tiêu hóa tách ra, vì vậy trong khoảng thời gian này phải tránh thường xuyên lấy ra bình nuôi cấy để quan sát.

Ngoài ra, thời gian tiêu hóa cũng phải khống chế thích đáng. Thông thường tiêu hóa đến khi mắt thường có thể nhìn thấy các hạt mô nhỏ là được, thời gian tiêu hóa quá dài sẽ dẫn đến tổn thương tế bào nặng thêm, ảnh hưởng đến tỷ lệ sống sót của tế bào.

Cuối cùng, đối với một số loại tế bào đặc biệt, có thể cần thêm một số yếu tố tăng trưởng đặc biệt để thúc đẩy sự tăng trưởng và nhân lên của tế bào. Nhưng điều quan trọng cần lưu ý là các yếu tố tăng trưởng này thường có chi phí cao hơn.