Quy trình hoạt động của bộ dụng cụ myoglobin chuột (MYO/MB) ELISA:

(1), mỗi lỗ trong lỗ mẫu được kiểm tra thêm 100μ1 mẫu được kiểm tra, mỗi mẫu được đặt 3 lỗ song song; Đặt hai lỗ kiểm soát âm tính, mỗi lỗ cộng với không được xử lý

Tế bào lysis của nhóm 100 μ1; Một lỗ kiểm soát trống khác được đặt và dung dịch lysis tế bào tinh khiết 100 μ1 được thêm vào.

b) Bảng tiêu chuẩn enzyme đặt 4 độ C, gói được qua đêm.

(3) tấm rửa: hút khô chất lỏng phản ứng bên trong lỗ, rửa bằng chất lỏng giặt một lần (sau khi chất lỏng giặt được đổ đầy lỗ tấm, tức là vứt đi), sau đó chất lỏng giặt được đổ đầy tấm

Lỗ, ngâm 1 - 2 phút, lắc liên tục. Ném chất lỏng trong lỗ rồi vỗ khô trên giấy thấm nước. Lặp lại giặt 3-4 lần.

(4) Các lỗ đối chứng âm tính được thêm vào PBS50μ1 mỗi lỗ, và các lỗ mẫu và lỗ trống được thêm vào 1: 500 dung dịch làm việc kháng thể AIF miễn phí của con người pha loãng 50μ1 mỗi lỗ.

(5) Bảng Enzyme được đặt trong hộp ẩm của hộp nuôi cấy 37 ℃, ủ trong 60 phút.

(6) Rửa tấm, cùng (4).

(7) Thêm 1: 5000 HRP pha loãng trên mỗi lỗ - chất lỏng làm việc chống miễn dịch dê được đánh dấu 100 μ1.

(8) Tấm tiêu chuẩn enzyme đặt trong hộp ẩm của hộp nuôi cấy 37 độ C, ủ 60 phút.

(9) Rửa tấm, cùng (4).

(10) Mỗi lỗ cộng với chất lỏng màu TMB 100 μ1, trộn nhẹ nhàng trong 10 giây, phản ứng trong bóng tối 37 ℃ 15-20 phút.

(11) Mỗi lỗ cộng với 100 μ12mo1/LH2S04 để chấm dứt phản ứng.

(12) đo tương ứng 450nm giá trị hấp thụ V1 và 630nm giá trị hấp thụ V2, cuối cùng đo được 0D giá trị là sự khác biệt của cả hai (V1-v2) để giảm bởi container

Các dấu xước hoặc dấu tay, v. v. gây ra sự quấy nhiễu ánh sáng.

(13) Xử lý dữ liệu: Giá trị S/N được tính sau khi giá trị ODD của mẫu vật (S) và đối chứng âm tính (N). S/N>2.1 là tiêu chí đánh giá dương tính.