Nhà cung cấp Bộ chiết xuất và tinh chế axit nucleic DNA

Nhà cung cấp Bộ chiết xuất và tinh chế axit nucleic DNAƯu điểm tính năng:

1.Tính cụ thể: Tất cả các mồi được sử dụng bởi các sản phẩm được phân tích kỹ lưỡng về tin sinh học, sau khiNgân hàng GenBankVà tỷ lệ tự xây dựng cơ sở dữ liệu khổng lồ, đảm bảo rằng mỗi mồi được sử dụng là một chi hoặc serotype cụ thể của các khu vực trình tự gen, có thể đạt được sự phát hiện cụ thể của các loài vi khuẩn và serotype, đặc hiệu đạt đượcGiai 。

2.Khả năng tái tạo: Tất cả các sản phẩm trong loạt bài này đã được xác minh bởi một số lượng lớn các chủng thử nghiệm với khả năng tái tạo làGiai 。

3.Độ nhạy: Dòng sản phẩm này cho phép phát hiện độ nhạy cao đối với vi khuẩn phát hiện khi nồng độ vi khuẩn trong mẫu đạt được103cfu / mlKhi đó, bạn có thể thực hiện phát hiện trực tiếp, không cần quá trình tăng vi khuẩn rườm rà.

4.Tính thực dụng: Phạm vi phát hiện rộng, bao gồm các tác hại nghiêm trọng hơn đối với cơ thể con người17Các vi khuẩn gây bệnh đường hô hấp và đường ruột có thể cho phép phát hiện nhanh các mẫu lâm sàng và các mẫu môi trường khác.3-4Một giờ.

5.lợi thế1Nguồn tài nguyên dồi dào, ngoại trừNgân hàng GenBankNgoài trình tự được công bố, công ty đã tiến hành giải mã trình tự một số lượng lớn các chủng, về mặt lý thuyết đảm bảo tính bảo thủ và đặc hiệu tốt của mồi được chọn.

6.lợi thế2: Bộ dụng cụ xét nghiệm này đều trải qua rất nhiều thí nghiệm bảo vệ và đặc hiệu, dựa vào nguồn tài nguyên nấm phong phú của công ty, mỗi bộ dụng cụ xét nghiệm đều trải qua20Xác minh tính bảo vệ của các chủng tiêu chuẩn và chủng lâm sàng khác và40Xác minh tính cụ thể của các chủng tiêu chuẩn và lâm sàng khác, đảm bảo không có kết quả báo cáo dương tính giả và âm tính giả trong quá trình sử dụng.

RNA và chiết xuất DNA:
Cracking: công thức cracking có thể là do bạn muốn trích xuất DNA hay RNA khác nhau, nhưng mẫu số chung là chất đệm lysis chứa nồng độ muối ly dịch cao.
Tác dụng của Chaotropes: Chaotropes phá vỡ các liên kết hydro và tương tác kỵ nước. Các muối ly dịch bao gồm guanidine hydrochloride, guanidine thiocyanate, urê và lithium peclorat.
Chất tẩy rửa: Ngoài chất khử trùng, thường có một số chất khử nhiễm trong bộ đệm cracking để giúp phân hủy protein và cracking.
溶tháng 6Enzyme và proteaseK: Tùy thuộc vào loại mẫu, enzyme cũng có thể được sử dụng để cracking. Protease K là một trong số đó và thực sự hoạt động tốt hơn trong các bộ đệm biến tính này; Khi sự thoái hóa protein tăng lên, tác dụng của protease K cũng tăng lên. Tuy nhiên, tantháng 6Enzyme không hoạt động trong quá trình thoái hóa và do đó hòa tantháng 6Quá trình xử lý enzyme thường được thực hiện trước khi muối biến tính được thêm vào.

Bước trích xuất:

1. Lấy mẫu từ tủ lạnh âm tám mươi và đặt trên băng từ từ rã đông; (Máy ly tâm làm lạnh trước đến 4 độ)

2. Sau khi rã đông (màu đỏ), thêm 200 μl chloroform (thêm chloroform thể tích là 1/5 thể tích Trizol), chấn động dữ dội (màu đỏ sữa), để trên băng 10 phút. (Cloroform là một dung môi hữu cơ, có hiệu quả làm cho pha hữu cơ và pha vô cơ nhanh chóng tách ra. Trong pha hữu cơ chủ yếu là phenol và protein liên kết, do đó làm cho protein và RNA tách ra, RNA đi vào pha nước.) ）

3. Đặt trong máy ly tâm làm mát trước, ly tâm (4 độ, 12.000 vòng/phút, 15 phút), có thể nhìn thấy rõ ràng trong ba lớp sau khi ly tâm (pha nước trong suốt không màu ở trên là lớp RNA, màu trắng sữa rất mỏng ở giữa là lớp DNA, màu đỏ ở dưới là lớp protein).

4. cẩn thận từ từ hấp thụ thanh lọc, khoảng 400 μl (thà ít hơn và không hấp thụ nhiều hơn), đặt trong một ống EP RNase-free 1,5 ml mới, thêm một lượng rượu isopropyl khác, trộn ngược lên xuống, để yên ở nhiệt độ bình thường trong 15 phút.

Ly tâm (4 độ, 12.000 vòng/phút, 15 phút), kết tủa màu trắng có thể nhìn thấy (đôi khi các tế bào ít hơn không nhìn thấy kết tủa, có thể được đặt âm 20 hoặc âm 82 giờ trước khi tiếp tục các bước tiếp theo)

Bỏ đi, mỗi ống thêm 950 ul 75% ethanol, trộn ngược lên xuống (nhớ không trộn đều bằng súng, điều này sẽ làm tan RNA).

7. Ly tâm (4 độ, 12.000 vòng/phút, 10 phút), kết tủa màu trắng rõ ràng ở phía dưới có thể nhìn thấy.

8. Sau khi ly tâm, loại bỏ việc làm sạch, đưa vào máy ly tâm thoáng qua một lần nữa, rửa sạch chất lỏng còn lại bằng pipet 10μl, mở nắp để sấy khô (khoảng 5 phút).

9. Mỗi mẫu theo kích thước kết tủa thêm lượng nước DEPC vừa phải (thường 20~30 μl, đôi khi không nhìn thấy kết tủa, có thể thêm 10 μl nước DEPC hòa tan), thổi RNA hòa tan, nồng độ đo nồng độ enzyme tầng mười một, giá trị OD (260/280=1,8-2,0) đánh dấu, bảo quản tám mươi âm.

Nhận xét: Đối với chiết xuất bạch cầu trung tínhRNA khuyến nghị số lượng tế bào lớn hơn 2x106/mẫu;

Ghi chú: Đeo khẩu trang trong quá trình vận hành.

Thiết kế mồi phải tuân theo các nguyên tắc sau:
Chiều dài mồi: 15-30bp, thường là khoảng 20bp.
② Khoảng mở rộng mồi: 200-500bp là thích hợp, trong điều kiện cụ thể có thể mở rộng đến 10kb đoạn.
③ Cơ sở mồi: hàm lượng G+C là 40-60% thích hợp, G+C quá ít khuếch đại hiệu quả không tốt, G+C quá nhiều dễ bị dải không đặc hiệu. ATGC được phân phối ngẫu nhiên tốt, tránh sắp xếp chuỗi hơn 5 nucleotide purine hoặc pyrimidine.
④ Tránh sự xuất hiện của cấu trúc thứ cấp bên trong mồi, tránh bổ sung giữa hai mồi, đặc biệt là sự bổ sung của đầu 3', nếu không nó sẽ hình thành một dimer mồi, tạo ra một dải khuếch đại không đặc hiệu.
⑤ Các cơ sở ở đầu 3'của mồi, đặc biệt là các cơ sở cuối cùng và cuối cùng, nên được yêu cầu nghiêm ngặt để ghép nối để tránh thất bại PCR do không ghép nối các cơ sở cuối.
⑥ Trong mồi có hoặc có thể thêm vào vị trí cắt enzyme thích hợp, trình tự mục tiêu được khuếch đại có vị trí cắt enzyme thích hợp, điều này rất có lợi cho phân tích cắt enzyme hoặc nhân bản phân tử.
⑦ Tính đặc trưng của mồi: mồi phải không có sự tương đồng rõ ràng với các trình tự khác trong cơ sở dữ liệu trình tự axit nucleic.

Lưu ý:

1. Bộ dụng cụ được lấy ra khỏi môi trường lạnh nên được sử dụng sau 15-30 phút cân bằng nhiệt độ phòng. Nếu gói tiêu chuẩn enzyme chưa được sử dụng hết sau khi tấm được mở ra, các thanh nên được đóng gói vào túi niêm phong để bảo quản. Chất tẩy rửa đậm đặc có thể có kết tủa tinh thể, khi pha loãng có thể được làm ấm trong bồn tắm nước để giúp hòa tan, khi rửa không ảnh hưởng đến kết quả.

2. Mỗi bước bổ sung mẫu nên được sử dụng và thường xuyên kiểm tra độ chính xác của nó để tránh lỗi thử nghiệm. Thời gian thêm mẫu một lần được kiểm soát trong vòng 5 phút, nếu số lượng mẫu vật nhiều, đề nghị sử dụng thêm mẫu súng trung đội.

3. Vui lòng làm đường cong tiêu chuẩn cùng một lúc với mỗi lần đo，Làm lại đi. Nếu hàm lượng chất được đo quá cao trong mẫu vật (mẫu vật)Giá trị OD lớn hơn giá trị OD của lỗ tiêu chuẩn di một lỗ), trước tiên hãy pha loãng một bội số nhất định (n lần) với dung dịch pha loãng mẫu trước khi xác định, khi tính toán xin vui lònglạiKích thước: Freesize (x n x 5).

4. Màng niêm phong chỉ được sử dụng một lần để tránh ô nhiễm chéo.

5. Vật nền xin tránh ánh sáng.

6. Thực hiện đúng theo hướng dẫn, kết quả kiểm tra phải dựa vào số đọc của máy đo enzyme.

7. Tất cả các mẫu, chất tẩy rửa và chất thải khác nhau nên được xử lý theo chất truyền nhiễm.

8. Các thành phần số lô khác nhau của thuốc thử này không được trộn lẫn.

9. Sản phẩm hết hạn không thể được sử dụng.

10. Nếu khác với hướng dẫn sử dụng tiếng Anh, lấy hướng dẫn sử dụng tiếng Anh làm chuẩn.

Sản phẩm công ty đang bán: