Chuột moc1/moc2 Ung thư biểu mô tế bào vảy miệng/nữ

thông tin cơ bản

Tên tế bào：Ung thư biểu mô tế bào vảy miệng ở chuột moc1/moc2

Dòng tế bào：C57BL / 6 Cxcr3 - / -

Nguồn Cell：Nước ngoài

Xác định tế bào：Chứng nhận STR đã được thông qua

Hình thái tế bào：Mẫu tế bào bạch huyết đa giác, dán tường+tăng trưởng lơ lửng

Môi trường：DMEM (với NaHCO3 1,5g/L) (BasMed-AW-013)+FBS 10%+P/S1% 500ML Môi trường: IMDM: F10/F12=2: 1313ml: 157ml Môi trường+FBS10% (50ml)+2,5mg/500ml insulin+20ug/500ml+2,5ug/500ml EGF+P/S 1% Kháng kép, 1%.

Điều kiện nuôi dưỡng：Giai đoạn khí: Không khí, 95%; CO2, 5%. Nhiệt độ: 37 độ C, 70% -80% độ ẩm trong buồng nuôi cấy

Nền tế bào：Ung thư biểu mô tế bào vảy miệng (OSCC) là một tập hợp con nổi bật của ung thư đầu và cổ, sáu loại ung thư phổ biến nhất. Yếu tố nguy cơ chính cho sự phát triển của OSCC là tiếp xúc với chất gây ung thư, phân biệt phân nhóm ung thư đầu và cổ này với ung thư đầu và cổ do virus homoma gây ra. Mặc dù có những tiến bộ trong xét nghiệm, phẫu thuật, hóa trị và xạ trị, tiên lượng của OSCC vẫn ổn định trong nhiều thập kỷ. Hơn nữa, tại thời điểm chẩn đoán, khoảng hai phần ba bệnh nhân OSCC bị bệnh tiến triển cục bộ, dẫn đến tăng tỷ lệ mắc và tử vong.

Sử dụng tế bào: Chỉ sử dụng cho nghiên cứu khoa học

Lưu ý

MOC1 tế bào hoạt động đặc biệt cao, giá trị gia tăng tốc độ rất nhanh, không đề nghị mật độ truyền quá lớn, và lựa chọn một lát mỏng, chờ đợi đầy đủ khoảng 80% thời gian truyền, rất khó để tiêu hóa, đề nghị thêm 0,25% EDTA vào sau khi trộn đều tất cả các tế bào tiếp xúc, đặt vào hộp nuôi để tiêu hóa, thời gian khoảng 3-4 phút sau khi lấy ra

2. Ở bên cạnh dụng cụ nuôi cấy tiến hành vỗ để giúp tế bào bóc ra, quá trình vỗ kéo dài khoảng 2 phút mới bóc ra hầu hết tế bào, nếu tỷ lệ rụng không nhiều, cũng có thể đặt lại vào hộp nuôi cấy tiếp tục tiêu hóa 1 - 2 phút sau lấy ra để tiến hành vỗ bóc ra, đợi 80 - 90% tế bào bóc ra rồi mới chấm dứt tiêu hóa, ly tâm treo lại bình, phân tán đều.

Độ bám tường của tế bào MOC2 và các tế bào thông thường tương tự không đặc biệt mạnh. Chu kỳ nhân đôi cũng không nhanh bằng MOC1. Điều trị bằng phương pháp tiêu hóa thông thường.

Vận chuyển ở nhiệt độ bình thường

Sau khi nhận được, bình T2 khử trùng và đặt trong hộp nuôi cấy 2 - 3 giờ, sau khi quan sát mật độ và trạng thái chụp ảnh 2 - 3 tấm phản hồi cho tiêu thụ, mật độ đạt tiêu chuẩn là có thể truyền lại. Tỷ lệ truyền đời giai đoạn đầu là 1,2, đợi đến khi truyền đời sau thì đề nghị đông lạnh một bình thành 1 ống lưu trữ đông lạnh 1 ml, một bình khác tiếp tục truyền đời, sau khi đông lạnh nhiều lần 2 - 3 con mới mở rộng làm thí nghiệm, phòng ngừa tình huống đột phát gây ra đứt đoạn.

Vận chuyển đá khôThông thường tế bào vận chuyển đông lưu trữ ống 2, phục hồi 1, một dự phòng khác, phục hồi đầu tiên không thành công khi phục hồi nghiêm ngặt theo yêu cầu của nhà sản xuất phục hồi ống thứ hai, không có phục hồi thành công tình huống ngay lập tức lưu trữ phục hồi hình ảnh thông báo cho chúng tôi.

tế bào dán tường

1. Bỏ đi nuôi cấy, rửa sạch tế bào bằng PBS không chứa canxi, ion magiê 1 - 2 lần.

2. Thêm 0,25% (w/v) -0,53 mM EDTA vào chai nuôi cấy (chai T25 1-2mL, chai T75 2-3mL), đặt trong một hộp nuôi cấy 37 ℃ tiêu hóa trong 1-2 phút (các tế bào khó tiêu hóa có thể kéo dài thời gian tiêu hóa thích hợp), sau đó quan sát sự tiêu hóa của tế bào dưới kính hiển vi, nếu phần lớn tế bào tròn và rơi ra, nhanh chóng lấy lại bàn điều khiển, sau vài lần nhấp vào chai nuôi cấy thêm 3-4ml môi trường chứa 10% FBS để chấm dứt tiêu hóa.

3. Nhẹ nhàng đánh đều rồi hút ra, ly tâm 3 - 5 phút trong điều kiện 1000 vòng M, bỏ đi chất lỏng, bổ sung 1 - 2 ml chất lỏng nuôi cấy rồi thổi đều. Đình chỉ tế bào được chia thành chai T25 mới/đĩa petri 6cm theo tỷ lệ 1: 2, thêm 6-8ml môi trường mới được cấu hình theo yêu cầu của hướng dẫn để duy trì sự tăng trưởng của tế bào, truyền thừa tiếp theo được thực hiện theo tỷ lệ 1: 2~1: 5 theo tình hình thực tế.

4. Đóng băng tế bào: Sau khi nhận được tế bào, nên đóng băng một số hạt giống tế bào trong quá trình nuôi cấy 3 thế hệ đầu tiên để sử dụng trong các thí nghiệm tiếp theo.

Môi trường vận chuyển (môi trường truyền dịch) không còn có thể được sử dụng để nuôi cấy tế bào, hãy thay thế bằng môi trường mới được điều chế theo các điều kiện nuôi cấy tế bào hướng dẫn.

Tế bào lơ lửng

Các tế bào phát triển trong trạng thái lơ lửng, có thể duy trì trạng thái tăng trưởng của tế bào bằng cách thêm môi trường nuôi cấy vào chai, nói chung, duy trì mật độ tế bào ở mức 1 × 10 ⁵~1 × 10 ⁶/mL (các tế bào khác nhau yêu cầu mật độ khác nhau) có thể duy trì sự phát triển bình thường của tế bào. Nếu cần chia chai có thể thu thập huyền phù tế bào vào ống ly tâm 1000rpm, ly tâm 5 phút, bỏ đi làm sạch, bổ sung 1-2mL nuôi cấy sau khi treo lại hỗn hợp, huyền phù tế bào được chia theo tỷ lệ 1: 2 vào chai T25 mới, thêm 6-8ml theo yêu cầu của hướng dẫn cấu hình môi trường mới để duy trì sức sống tăng trưởng của tế bào, tiếp theo truyền theo theo tình hình thực tế theo tỷ lệ 1: 2~1: 4.

An toàn sinh học

Tất cả các tế bào động vật được coi là có khả năng gây nguy hiểm sinh học, phải được vận hành trong bảng an toàn sinh học thứ cấp và chú ý bảo vệ, tất cả các chất thải và dụng cụ đã tiếp xúc với tế bào này cần được khử trùng để loại bỏ.

2. Nên luôn sử dụng găng tay bảo hộ, quần áo và đeo mặt nạ bảo hộ khi hồi sức các tế bào đông lạnh. LƯU Ý: Các ống lưu trữ đông lạnh bị rò rỉ khi ngâm trong nitơ lỏng và sẽ từ từ được lấp đầy bằng nitơ lỏng. Khi tan băng, việc chuyển đổi nitơ lỏng thành pha khí có thể khiến thùng chứa phát nổ hoặc thổi bay nắp của nó bằng lực nguy hiểm, tạo ra các mảnh vụn bay để gây thương tích cho người.